1990年，初二那年被特招进入上海儿艺，又经过三年的京剧武打训练、参与了700多场次的舞台剧演出。1993年在电影《
第一诱惑》中饰演小浩。
1999年夏天，陆毅带着他的毕业大戏《
家》和小剧场话剧《庄周戏妻》进京演出，《家》中的觉新和《庄周戏妻》中的楚王孙，这两个相去甚远的角色充分展示了陆毅的表演功底。
1999年，还没大学毕业的陆毅接拍了海岩剧《
永不瞑目》，并且凭借《永不瞑目》获得2000年中国电视剧金鹰奖最佳男主角及观众最喜爱的男演员两项大奖。
2000年，出演赵宝刚的年代大型电视剧《
像雾像雨又像风》，并获得最受台湾观众欢迎的“深情男士”奖。
2001年，首次主演古装电视剧《
少年包青天2》，同年主演青春偶像剧《海洋馆的约会》。
2002年，主演由著名导演唐季礼执导的首部足球题材电视剧《
壮志雄心》并演唱同名主题曲，同年参演反腐题材电视剧《
浮华背后》，同年2月首次主演电影《
一见钟情》。
2003年，与林心如主演时装爱情青春偶像剧《
男才女貌》，此剧在CCTV8套首播时收视成绩在央视电视剧节目中排名第一。同年6月，发布第一张音乐专辑《非同寻常》。
2004年，与章子怡合作出演电影《
茉莉花开》，出演电视剧《
向左走向右走》。
2005年，与赵薇合作出演爱情文艺电影《
情人结》，并获得第8届上海国际电影节最佳男演员和第8届中国长春电影节最佳男演员提名。同年参演徐克执导武侠电影《
七剑》。同年3月7日陆毅在北京正式推出他的第二张专辑《毅犹未尽》，获得多项音乐奖项。
2007年后，主演了王文杰执导的古装历史题材电视剧《
大槐树》《
苏东坡》，随后又和赵宝刚合作了谍战剧《
夜幕下的哈尔滨》并获得第3届BQ红人榜年度最受欢迎男演员。
2008年出演电视剧《
我的青春谁做主》。
2009年，出演大型古装电视剧《
三国》饰演诸葛亮，并参演《
美丽密令》《
唐山大地震》《
线人》《
跟我的前妻谈恋爱》等不同类型电影。
2010年主演电视剧《天堂秀》，剧中陆毅饰演的邝良是一个苏绣设计师兼企业家。2011年主演谍战题材电视剧《
掩护》。
2012年主演电影《甲午大海战》和电影《
新妈妈再爱我一次》，并主演电视剧《
假如生活欺骗了你》，获得BQ红人榜年度突破演员。
2013年主演电视剧《
宫锁连城》、《
大汉情缘之云中歌》以及电影《
英雄之战》。
2014年3月21日其主演的电影《英雄之战》上映。4月电视剧《宫锁连城》在湖南卫视播出。并主演励志情感医疗剧《
长大》。2014年陆毅携女儿参与湖南卫视节目《
爸爸去哪儿2》。
2015年1月29日，主演的青春励志剧《长大》登陆东方卫视与天津卫视黄金档播出。2月19（大年初一）其主演的电影《爸爸去哪儿2》上映。
2015年02月17日，参加2015年中央电视台春节联欢晚会，表演歌曲《幸福家家有》；同年作为主演之一参与电视剧《
致单身男女》的拍摄。同年参演谍战剧《
胭脂》与赵丽颖合作。